Mer基因过表达对内皮细胞株HMEC-1细胞血管形成的影响及其机制探讨
发布时间:2021-01-16 09:29:15
《中华血液学杂志》2007年第28卷第9期 中国研究者探讨了受体酪氨酸家族成员Mer基因对体外血管形成过程的影响及其具体作用机制研究者利用脂质体法将人全长Met基因真核表达质粒转染到内皮细胞株HMEC-1细胞中,G418筛选转染细胞得到阳性克隆,利用PCR和Westernblot分别在mRNA和蛋白水平验证转染情况。利用Transwell和Matrigel分别观察Mer基因过表达对于内皮细胞迁移能力和血管形成能力的影响。通过荧光定量PCR筛选血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、VEGFR-2基因的表达情况。结果发现经过G418筛选后,PCR和Westernblot检测结果显示Mer基因在阳性克隆细胞中有较高水平表达,分别较空质粒对照组上升3.61倍和2.12倍;高表达Mer的HMEC1细胞迁移能力[迁移到Transwell下室壁的细胞(21±6)/视野]较对照组[(36±11)/视野]明显下降。体外血管形成实验也表明高表达Mer基因的HMEC-1细胞血管形成能力明显下降,抑制率为76.9%;荧光定量PCR结果显示VEGF-C和VEGFR-2表达明显下降,VEGF-C表达量为对照组的44.7%,VEGF-C表达为对照组的25.6%。由此,研究者得出结论,Mer过表达可以显著抑制HEMC-1细胞的迁移能力和血管形成能力,并且可能是通过VEGF-C/VEGFR-2信号途径发挥作用。
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