肾穿刺活检石蜡组织切片DNA的提取和PCR扩增
发布时间:2020-08-07 13:28:15
2008年03月12日 《中华肾脏病杂志》-2007年23卷11期 -740-743页 医学空间(MEDcyber.com)3月12日消息,该项研究目的是建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法采用方法是肾脏病理诊断乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块,包埋时间1月-5年。提取方法包括清洁切片、融蜡、消化及DNA的提取。紫外分光光度计测定DNA浓度。应用聚合酶链反应(PCR)扩增血管紧张素转换酶(ACE)和乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因片段。结果2张2Ixm厚石蜡切片获取的DNA总量为10-30μg。ACE基因的PCR扩增结果显示,6例标本均在490bp和(或)190bp处显示清晰条带。HBcAg的PCR扩增结果显示,2例乙肝病毒相关性肾小球肾炎标本在132bp处显示清晰条带,其余4例阴性。由此得出结论本方法可以从肾穿刺活检石蜡切片中获取足够高质量DNA并进行PCR扩增,方法简便,结果稳定,不受包埋时间长短的限制,为肾脏疾病的辅助诊断、肾活检组织的宗遗传学分析提供了可能。
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