Smad信号传递途径调节肾小管上皮细胞转分化实验
发布时间:2019-08-21 08:36:15
2006年04月04日 肾脏病与透析肾移植杂志2005 Vol.14 No.3 P.230-234 21 (南京)了研究转化生长因子β1(TGF-β)诱导人肾小管上皮细胞(HKC)转分化作用与其细胞内信号传递途径的关系研究者以细胞间粘连蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)作为肾小管上皮细胞转分化的观察指标,借助细胞培养、蛋白印迹和基因转染等方法,检测TGF-β1引发的Smad信号途径的变化,和TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化作用。将含有Smad 7基因表达质粒转染HKC细胞,观察高表达的Smad 7蛋白对TGF-β1作用的影响。结果实验结果表明①TGF-β1作用HKC细胞10 min即可磷酸化HKC细胞内Smad2/3蛋白,而且此作用可持续48h以上;②TGF-β1作用HKC细胞6h即可下调E-cadherin蛋白的表达,24h后能诱导该细胞表达α-SMA,其作用呈明显的剂量依赖关系;③转染Smad7表达质粒的HKC细胞,可拮抗TGF-β1诱导HKC细胞表达α-SMA以及下调E-cadherin蛋白表达的作用;④应用特异性MAP激酶抑制剂(PD98059和SC68376)和PI3激酶抑制剂(Wortmannin)均不能拮抗TGF-β1的作用。可见TGF-β1诱导的上皮细胞转分化作用是依赖其引发的Smad信号途径,阻断该信号传递途径则能够拮抗TGF-β1的作用。
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